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雞過氧化氫酶(CAT)酶聯免疫分析試劑盒

  • 產品型號:
  • 產品時間:2021-07-22
  • 簡要描述:雞過氧化氫酶(CAT)酶聯免疫分析試劑盒本生生物公司供應:ELISA試劑盒,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器。
  • 產品簡介

雞過氧化氫酶(CAT)酶聯免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:96T
0.6 U/L -16 U/L
使用目的:
本試劑盒用于測定雞原代肝細胞樣本中過氧化氫酶(CAT)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞過氧化氫酶(CAT)水平。用純化的雞過氧化氫酶(CAT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入過氧化氫酶(CAT),再與 HRP標記的過氧化氫酶(CAT)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化氫酶(CAT)呈正相關。用酶標儀在  450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞過氧化氫酶(CAT)濃度。
雞過氧化氫酶(CAT)酶聯免疫分析 試劑盒組成


標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。


2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復 5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液    50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15分鐘以內進行。
雞過氧化氫酶(CAT)酶聯免疫分析試劑盒操作程序總結:


計算
以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在 5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.雞過氧化氫酶(CAT)酶聯免疫分析 試劑盒請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本  OD值大于標準品孔第一孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月


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