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猴Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒代測

  • 產品型號:BS-8977
  • 產品時間:2020-11-11
  • 簡要描述:猴Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒代測本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器。
  • 產品簡介

猴Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒代測本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器。

本試劑盒僅供研究使用

檢測范圍: 96T

使用目的:

本試劑盒用于測定猴血清、血漿及相關液體樣本中Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)水平。用純化的Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加硫酸類肝素(HS),再與HRP 標記的Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)濃度。

試劑盒組成:

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標試劑 6ml×1 瓶

3 酶標包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶

5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶

7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標準品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份

11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個

標本要求

1. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2. 不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

60 ng/L5 號標準品150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液

30 ng/L4 號標準品150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

15 ng/L3 號標準品150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

7.5 ng/L2 號標準品150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

3.75 ng/L1 號標準品150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,

然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡

量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同 3。

8. 洗滌:操作同 5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

猴Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒代測操作程序總結:

計算:

以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,

即為樣品的實際濃度。

猴Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA檢測試劑盒代測注意事項

1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。

7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1. 試劑盒保存:;2-8℃。

2. 有效期:6 個月

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